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RNA97011河豚毒素檢測試劑盒

 1 概要

河豚毒素(TTX)是一種強神經毒素,其性質穩定,加熱、鹽腌及高溫烹煮均不能使其破壞。對人的最小致死量約為0.5mg/60公斤體重。因誤食或食用加工不當的河豚魚而發生人畜中毒的事件每年都有發生。故準確檢測河豚魚中的河豚毒素對預防和控制河豚毒素中毒,具有重要意義。本檢測方法具有靈敏、快速、簡便、特異性好、取樣量小、不破壞魚體結構,并可同時檢測大量樣品等優點。

2 測定原理

本測試盒利用固相酶聯免疫吸附原理,采用間接競爭ELISA法進行測定。用抗原包被微孔板,加入河豚毒素標準品或樣品、抗河豚毒素酶標單克隆抗體進行免疫反應后,將未與包被抗原結合的抗體洗去;再加入酶標記的抗鼠IgG抗體孵育,加入顯色液,經終止液終止后,用酶標儀在450nm處測定OD值。

3 提供的物品

微孔板

5個濃度的TTX標準溶液(各0.6mL

標準10 ng/mL   ……………………………………………………………直接使用

標準210.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標準330.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標準490.0ng/mL       ………………………………………………………直接使用

標準5270.0ng/mL     ………………………………………………………直接使用

抗體溶液(6mL)     ……………………………………………………………直接使用

酶標物(11mL)       ……………………………………………………………直接使用

顯色液(11mL)       ……………………………………………………………直接使用

終止液(6mL)  …………………………………………………………………直接使用

10x PBST濃縮液(30mL)      …………………………………………………稀釋使用

 

該公司產品分類: 試劑盒

雞乙酰乙酸檢測試劑盒/雞ACAC ELISA試劑盒

  DJ023雞乙酰乙酸檢測試劑盒/雞ACAC ELISA試劑盒的詳細資料:

產品名稱:雞乙酰乙酸檢測試劑盒/雞ACAC ELISA試劑盒

雞熱休克蛋白40試劑盒/雞HSP-40 ELISA試劑盒 雞傳染性鼻炎抗體試劑盒/雞IC ELISA試劑盒 雞熱休克蛋白20試劑盒/雞HSP-20 ELISA試劑盒 雞層連蛋白/板層素試劑盒/雞LN ELISA試劑盒 雞熱休克蛋白60試劑盒/雞Hsp-60 ELISA試劑盒 雞補體3裂解產物試劑盒/雞C3SP ELISA試劑盒 雞白介素4試劑盒/雞IL-4 ELISA試劑盒  雞病毒性腸炎病毒試劑盒/雞DEV ELISA試劑盒 雞白介素2試劑盒/雞IL-2 ELISA試劑盒 雞表皮生長因子試劑盒/雞EGF ELISA試劑盒 雞血清一氧化氮試劑盒/雞NO ELISA試劑盒 雞白血病抑制因子試劑盒/雞LIF ELISA試劑盒 雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體試劑盒/雞HSVⅡ-Ab ELISA試劑盒 雞白血病病毒抗原試劑盒/雞ALV-AG ELISA試劑盒 雞補體3裂解產物試劑盒/雞C3SP ELISA試劑盒 雞白痢抗體檢測試劑盒/雞PD ELISA試劑盒 雞腎上腺髓質素試劑盒/雞ADM ELISA試劑盒  雞白介素9試劑盒/雞IL-9 ELISA試劑盒 雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1試劑盒/雞AmAC-1 ELISA試劑盒 雞白介素6試劑盒/雞IL-6 ELISA試劑盒 雞免疫核糖核酸試劑盒/雞Irna ELISA試劑盒  雞白介素4試劑盒/雞IL-4 ELISA試劑盒 雞β內酰胺酶試劑盒/雞β-lactamase ELISA試劑盒  雞白介素3試劑盒/雞IL-3 ELISA試劑盒 雞流行性乙型腦炎抗體IgG試劑盒/雞JE IgG ELISA試劑盒 雞白介素2試劑盒/雞IL-2 ELISA試劑盒

該公司產品分類: Eppendorf Gilson Thermo 大龍(Dragon) 百得(Biohit) 移液器 魚Elisa試劑盒 羊Elisa試劑盒 貓Elisa試劑盒 鴨Elisa試劑盒 植物Elisa試劑盒 倉鼠Elisa試劑盒 馬Elisa試劑盒 其他Elisa試劑盒 豚鼠Elisa試劑盒 小鼠Elisa試劑盒 大鼠Elisa試劑盒 雞Elisa試劑盒 犬Elisa試劑盒 豬Elisa試劑盒

MD-JQKJ-I甲醛快速檢測試劑盒

用途:測量水、食品中甲醛含量儀器特點:不需要儀器,快速、半定量檢測水產品、水發食品、米面豆制品等中人為加入的甲醛或吊白塊采用獨特的“預包被”微孔檢測板—使用更方便,產品更穩定檢測產物呈紫紅色,與色階比較得出待測樣品中甲醛的濃度范圍采用改裝的酶標儀在550nm讀數可進行甲醛定量檢測包含檢測所需的所有試劑及消耗品主要技術參數:檢出線:4mg/l,含實驗器材,100次測定。檢測時間:3到15分鐘測定范圍:0-100 ppm,下限1ppm 

H7N9雙色熒光定量檢測試劑盒

禽流感病毒H7N92013)核酸測定試劑盒(熒光PCR法)
Avian influenza virus (H7N9) Real Time RT-PCR Kit
【產品名稱】
通用名稱:禽流感病毒H7N92013)核酸測定試劑盒(熒光PCR法)
英文名稱:Avian influenza virus (H7N9) Real Time RT-PCR Kit
【包裝規格】 25人份/盒
【預期用途】通過對樣本中禽流感病毒H7基因和N9基因的特異性RNA核酸片段分別進行定性檢測,可用于臨床對可疑感染患者的病原學鑒別診斷。
【檢驗原理】本試劑盒采用聚合酶鏈式反應(PCR)技術結合熒光探針技術,對禽流感H7N9特異性核酸片段進行熒光PCR檢測。
【試劑盒主要組成成份】

 

 

序號
組分
 數量
 體積/人份
1
H7N9核酸熒光PCR檢測混合液
480ul×1        
19ul
2
RT-PCR
28ul×1
1ul
3
DEPC-H2O 
400ul×1
4
陽性對照品
30ul×1

 

 
說明:不同批號的組分不可以互換使用。
自備試劑:Trizol;氯仿;75%乙醇;異丙醇或磁珠法RNA提取試劑;本公司可以代為訂購或提供銷售商聯系方式。
【儲存條件和有效期】 試劑盒應在-20℃及以下溫度避光保存,有效期12個月。采用冰盒行運輸;熒光PCR檢測混合液反復凍融不宜超過3次。
【適用儀器】 本試劑盒適用于ABI7000ABI7300ABI7500ABI7900MJ-chromo4MX3000PMX3005PSmartCyclerⅡ,Rotor-Gene6000Lightcycler R480iCycleriQ4iCycleriQ5Bio-Rad CFX96SLAN等多色熒光PCR儀及相應軟件。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100?l氯仿, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA
2.試劑配制
n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環參數設置:
45×10min; 95×15min;循環一次,再按95×15sec→60×60sec,循環45;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
備注:如使用ABI系列PCR儀,請務必于passive reference 和 quencher處均選擇none
5. 閾值設定
閾值設定原則以閾值線剛好超過DEPC-H2O的最高點。
6. 質量控制:試劑盒各對照品須達到以下要求,否則實驗視為無效。

 

 

Ct
FAM通道(檢測H7
HEX/VIC/JOE(檢測N9
DEPC-H2O
UNDET45
UNDET45
陽性對照品
≤35
≤35

 

 
7. 試驗結果的判斷

 

 

通道
Ct
結果判斷
1
FAM+HEX
UNDET45
樣本低于檢測限,報告為陰性
2
FAM+HEX
43
FAM通道為H7基因陽性;
HEX/VIC/JOE通道為N9基因陽性
3
FAM+HEX
4345
復檢一次,如仍為4345,則報告為陰性

 

 
進行定量檢測時,儀器生成標準曲線后,自動顯示待檢樣品定量值。
【參考值范圍】陰性(檢測對象H7N9為病原微生物,在健康人體中不存在)。
【對檢驗結果的解釋】實驗室環境污染,試劑污染,樣品交叉污染會出現假陽性結果;試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果。
【檢驗方法的局限性】當檢測樣本中被檢核酸濃度含量低于最低檢測限5×103copies/ml時可能會發生假陰性的結果。
【產品性能指標】最低檢測限:1×103copies/ml
【注意事項】 開始檢測前請仔細閱讀本說明書全文。
1. 整個檢測過程應嚴格分在三區進行:PCR反應體系的配制區;標本處理、加樣區;PCR擴增、熒光檢測及結果分析區。各區使用的儀器、設備、耗材和工作服應獨立專用。實驗后即請清潔工作臺,并進行消毒。
2. 使用不含熒光物質的一次性手套經常替換) 、一次性專用離心管、自卸式移液器和帶濾嘴吸頭。
3. 試劑準備和標本處理應使用超凈工作臺負壓式或防污染罩,以防止對環境污染。
4. 每次實驗應設置陰、陽性對照品。
5. 操作人員應經過專業培訓,具有一定經驗和操作技能。
6. 操作臺、移液器、離心機、PCR擴增儀等儀器設備應經常用10%次氯酸或75%酒精、紫外線燈或臭氧消毒處理。
7. 實驗中接觸過標準品和對照品的廢棄物品(如吸頭)、擴增完畢的離心管、標本等應進行無害化處理后方可丟棄。
8. 試劑使用前應在常溫下充分融化并混勻。
9. PCR反應混合液應避光保存。
10. 反應管中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊。
11. 不同批號的試劑請勿混用,請在有效期內使用試劑盒。
該公司產品分類: 其他水產病毒病害檢測系列 魚類水產病毒病害檢測系列 蝦類水產病毒病害檢測系列 水產病害類試劑盒 其它致病菌檢測系列 食源性致病菌檢測系列 致病微生物系列試劑盒 小宗農產品檢測系列(PE) 轉基因水稻檢測系列(PD) 轉基因大豆檢測系列(PC) 轉基因玉米檢測系列(PB) 初篩系列(PA) 轉基因農產品試劑盒 公共衛生檢疫試劑盒 傳染病類診斷制劑 禽病類檢測試劑盒 豬病類檢測試劑盒 LEWIS大鼠 129/Se小鼠 F344大鼠

GL1976尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)供應

名稱:尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)產地:國產|進口品牌:百奧萊博編號:GL1976規格:50T用途:磷鎢酸還原法檢測血清、血漿、尿液等樣本的肌酐含量,無需制備蛋白濾液注意事項:尿酸被磷鎢酸氧化成尿囊素和二氧化碳,磷鎢酸被還原成鎢藍,分光光度計660nm比色檢測吸光度。保存:4℃,避光,6個月關鍵詞:UA,GL1976,磷鎢酸比色法我公司的尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)供應,性價比高,貨期短,送貨上門,歡迎您來電咨詢購買,另外,我公司還生產供應銷售下列產品:

 

編號 名稱
GL0438 Weigert鐵蘇木素染色液
GL1265 DNA堿性轉移緩沖液
GL1239 Tris飽和酚(pH>7.8)
GL0987 甘油-亞甲藍染色液
GL1246 P:C:I(125:24:1,pH﹤5.0)
GL0535 FAB固定液
GL0380 支原體染色檢測試劑盒
GL1720 檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液(0.1mol/L,pH3.0-6.6)
GL1870 總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)
GL1745 乙醇溶液(75%)
GL0504 葡萄糖-6-磷酸酶染色液(鉛法)
GL1742 碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液(0.1mol/L,pH9.16-10.83)
GL1137 ELISA包被緩沖液(1×)
GL0652 蘇木素伊紅混合染色液(一步法)
GL2032 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒(PNP微板法)
GL2078 單胺氧化酶(MAO)檢測試劑盒(醛苯腙比色法)
尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)供應
GL0234 無菌山梨醇-磷酸鹽溶液(pH7.5)
GL2085 α-巖藻糖苷酶(AFU)檢測試劑盒(PNP-F終點比色法)
GL1376 SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
GL1053 Karasson-Schwlts磷酸鹽緩沖液
GL2077 單胺氧化酶(MAO)檢測試劑盒(醛苯腙微板法)
GL0805 改良油紅O染色液
GL0149 SOB培養基(pH7.0)
GL0910 鈣鹽染色液(改良茜素紅S法)
GL0007 放線菌素D溶液(1mg/ml)
GL0924 鉬酸銨負染色液
GL0404 精子形態學染色液(Shorr法)
尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)供應
GL0205 Ficoll 400鋪墊液(1.25%)
GL0379 煌焦油藍染色液
GL0265 Caspase 4 活性檢測試劑盒(比色法)
GL0759 酚酞-尼羅藍指示劑
GL0646 纖維素染色液(改良MSB法)
GL1042 PBS磷酸鹽粉劑(0.1mol/L)
GL1926 無機磷檢測試劑盒(黃嘌呤氧化酶比色法)
GL0231 無菌山梨醇溶液
GL0332 細胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)
GL0677 伊紅染色液(進口水溶)
GL0009 利福平溶液(50mg/ml)
GL1231 鹽酸胍溶液(8mol/L)
GL1307 無菌去離子水(For PCR)
GL1727 葡萄糖溶液(無菌)
GL1982 總膽固醇(TC)檢測試劑盒(COD-PAP雙試劑比色法)
尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)供應

該公司產品分類: 國產血清 進口血清 免疫血清 封閉用血清 血漿 脫纖維血 抗凝血 裂解血 紅細胞 其他血液制品 一抗 二抗 HRP標記抗體 膠體金標記抗體 FITC標記抗體 RBITC標記抗體 BIOTIN標記抗體 生物素化抗體 動物Ig類抗體 抗原

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒

南京森貝伽生物公司細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒、elisa試劑盒、血清、凝膠等,優惠促銷中,保證產品質量。另我司還提供售前、售中、售后全方位免費技術指導,如有需要,歡迎來電咨詢!

 

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒產品簡介:

貨號:SBJ-0232

英文名稱:Cell cycle and apoptosis assay kit

產品規格:50T

保存條件:-20℃,避光,12個月

品牌:森貝伽

應用:細胞染色

 

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒產品注意事項:

自備乙醇70%和PBS,流式細胞儀488nm處檢測紅色熒光。

 

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒產品用途:

流式細胞術檢測細胞周期、細胞凋亡。 

 

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒其它產品:

Earle's平衡鹽粉劑(1×EBSS,含鈣鎂糖),SBJ-0051,1L/10×1L,細胞培養,4℃,12個月

Earle's平衡鹽粉劑(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅),SBJ-0052,1L/10×1L,細胞培養,4℃,12個月

Earle's平衡鹽粉劑(1×EBSS,無鈣鎂糖),SBJ-0054,1L/10×1L,細胞培養,4℃,12個月

Earle's平衡鹽粉劑(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅),SBJ-0056,1L/10×1L,細胞培養,4℃,12個月

Earle's平衡鹽溶液(1×EBSS,含鈣鎂糖),SBJ-0058,500ml,細胞培養,4℃,3個月

Earle's平衡鹽溶液(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅),SBJ-0059,500ml,細胞培養,4℃,3個月

Earle's平衡鹽溶液(1×EBSS,無鈣鎂糖),SBJ-0060,500ml,細胞培養,4℃,6個月

Earle's平衡鹽溶液(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅),SBJ-0061,500ml,細胞培養,4℃,6個月

Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,含鈣鎂糖),SBJ-0062,500ml,細胞培養,4℃,3個月

Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,含鈣鎂糖酚紅),SBJ-0063,500ml,細胞培養,4℃,3個月

Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,無鈣鎂糖),SBJ-0064,500ml,細胞培養,4℃,6個月

Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,無鈣鎂糖酚紅),SBJ-0065,500ml,細胞培養,4℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌),SBJ-0066,100ml/500ml,細胞培養,4℃,2個月

HEPES溶液(1mol/L,Free Acid),SBJ-0068,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0),SBJ-0069,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES-BSA溶液(HA溶液),SBJ-0070,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES-BSA溶液(HACM溶液,含鈣鎂),SBJ-0071,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH6.8),SBJ-0072,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH7.0),SBJ-0073,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH7.2),SBJ-0074,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH7.4),SBJ-0075,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES溶液(1mol/L,pH7.5),SBJ-0076,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES粉劑(1mol/L,Free Acid),SBJ-0077,100ml,細胞培養,室溫,12個月

HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,pH6.7),SBJ-0078,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,7.05),SBJ-0079,100ml,細胞培養,-20℃,6個月

該公司產品分類: 牛ELISA試劑盒說明書 植物ELISA試劑盒說明書 兔ELISA試劑盒說明書 其他ELISA試劑盒說明書 猴ELISA試劑盒說明書 羊ELISA試劑盒說明書 鴨ELISA試劑盒說明書 雞ELISA試劑盒說明書 豬ELISA試劑盒說明書 豚鼠ELISA試劑盒說明書 小鼠ELISA試劑盒說明書 大鼠ELISA試劑盒說明書 人ELISA試劑盒說明書 ELISA試劑盒說明書 結締染色 脂類染色 HE染色 金屬及鹽染色 植物染色 核酸染色

細胞活力藍色熒光檢測試劑盒

產品名稱:細胞活力藍色熒光檢測試劑盒

規格:50次

質量標準:性能穩定

  細胞活力藍色熒光檢測試劑盒由上海哈靈生物科技有限公司提供,產品都是經過嚴格檢驗測試后才出庫的,請新老顧客放心購買!公司提供良好的售前售后服務,為您的實驗保駕護航!

  細胞活力藍色熒光檢測試劑盒的同類型產品:

純化線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 100
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完全線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 20
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真菌/酵母細胞線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 20
冰凍切片線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 20
純化線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒 100
活體細胞線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒 20
完全線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒 20
活體組織線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒 10
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過氧化氫處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
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紫外線處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
細胞DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
紅細胞超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒   50
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒  50
植物超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒  50
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解樣品制備試劑盒  50
酵母/真菌超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒  50
超氧化物歧化酶(SOD)細菌裂解樣品制備試劑盒  50
細菌超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒  50
細胞超氧化物陰離子化學發光法定量檢測試劑盒 20次
組織超氧化物陰離子化學發光法定量檢測試劑盒 20次
冰凍切片脂質過氧化物亞油酸(linoleic acid)熒光染色試劑盒 10
石蠟切片脂質過氧化物亞油酸(linoleic acid)熒光染色試劑盒 10
脂質過氧化物亞油酸(linoleic acidELISA定量測定試劑盒 48/96
脂質過氧化物亞油酸(linoleic acid)高效液相色譜 HPLC)分析試劑盒 20
細胞硫代巴比妥酸反應物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒 20/50
組織硫代巴比妥酸反應物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒 20
血液硫代巴比妥酸反應物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒 20
該公司產品分類: 其他標準品 抗體 進口elisa試劑盒 國產標準品 豚鼠elisa試劑盒 小鼠elisa試劑盒 其他試劑盒 其他試劑盒 培養基 中藥標準品 標準品 檢測試劑盒 大鼠elisa試劑盒 人elisa試劑盒 elisa試劑盒

20次/50次TUNEL原位檢測試劑盒(通用)(BIOTIN標記POD法)

凱基TUNEL細胞凋亡原位檢測試劑盒(通用)

(BIOTIN標記POD法,適用于細胞、組織樣本)

Cat:KGA702,703,704

(20,50,100Tests)

一 TUNEL檢測原理

凱基TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測細胞在凋亡過程中細胞核DNA的斷裂情況,其原理是生物素(biotin)標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細胞中斷裂的DNA的3-OH末端,并可與連接了的辣根過氧化酶的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)特異結合,在辣根過氧化酶底物二氨基聯苯胺(DAB)的存在下,產生很強的顏色反應(呈深棕色),特異地定位正在凋亡的細胞,因而在普通顯微鏡下即可觀察和計數凋亡細胞;由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細胞樣本(細胞涂片)的凋亡原位檢測。

二 TUNEL試劑盒組分

組 份

Cat: KGA702

20 assays

Cat: KGA703

50 assays

Cat: KGA704

100 assays

儲存條件

Equilibration Buffer

1.0 mL

2.5 mL

5.0 mL

-20℃

Biotin-11-dUTP

20μL

50μL

100μL

-20℃

TdT Enzyme

80μL

200μL

400μL

-20℃

50×Proteinase K

40μL

100μL

200μL

-20℃

Streptavidin-HRP

10μL

25μL

50μL

4℃避光

DAB

2mg

5mg

10 mg

-20℃

注意事項

1 使用前請認真閱讀本說明書,提前準備好相關試劑。

2 因本試劑盒中組分均為微量,使用前請離心集液。

3 為避免試驗誤差、降低試劑的損耗,建議使用精密度高的進口微量移液槍及槍頭。

4 TdT 酶反應液在使用前根椐樣本數量集中配制,再分別滴加于各樣本片上,避免每個樣本單獨配制而產生的試劑損耗。

5 另因DAB為固體粉末,使用前加入適量PBS溶解,配制成20×DAB(10 mg/ml)后,按下述方法顯色使用。

6 用戶自備:二甲苯、多聚甲醛、PBS、H2O2 、TritonX-100、檸檬酸鈉、復染染液:蘇木素或甲基綠等、蓋玻片、載玻片、染色缸。

三 操作流程概覽

本試劑盒特點● 操作簡便:使用Ready-to-Use型試劑,并配有Proteinase K 和DAB。

● 高靈敏度:可以單一檢出初期的凋亡細胞。

● 高特異性:能特異性染色凋亡細胞。

● 快速操作:整體操作約需3小時。

● 用途廣泛:可應用于組織切片、細胞樣本等。

● 方便觀察:使用光學顯微鏡觀察實驗結果。

● 高正確性:有陽性對照片的制備方法,可以確認試劑盒的性

四 檢測樣本的預處理

TUNEL檢測時樣本的預處理是試驗的關鍵所在,本說明書推薦的條件僅為普遍情況,用戶需根椐自已的樣本材料及試驗結果來調整各個條件(參照Page 9),如處理時間、處理濃度等,來優化出適合自身樣本的試驗條件,從而做出客觀的試驗結果。

1 細胞樣本的準備.

操作注意事項:

1. 為防止樣本脫落,請使用硅烷(Silane)處理的載玻片或采用多聚賴氨酸鋪片。

2. 固定好的樣本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分鐘~一晚,以改善細胞的滲透性。

3. 使用PBS清洗細胞樣本時,不要直接加在細胞樣本上,以防止細胞樣本的脫落。

4. 進行PBS清洗時,以5分鐘清洗3次為標準。

5. 固定液、PBS、封閉液、通透液、染色缸需用戶自備,請按上述方法配制。

2 石蠟組織切片的預處理

* 注意事項:蛋白酶K處理的使用濃度、處理時間及溫度,都因組織的類型不同而有所不同,需要自已摸索優化上述條件,如有問題,請根椐本說明書Page 9的《常見問題的原因及推薦解決方案》來調整條件。例如:如果凋亡細胞染色較弱時,可用高濃度的Proteinase K(400μg/ml)處理5分鐘。(本試劑盒的50×Proteinase K濃度為1mg/ml)。

其它替代方法: 石蠟切片的預處理也可根椐實際情況可采用下述三種替代方法之一,即蛋白酶K處理的步聚改用下述方法,其余步聚均相同:

替代方法1: 將脫蠟及水合好的切片浸入通透液中8-10 min(通透液:0.1%TritonX-100溶于0.1%檸檬酸鈉,需新鮮配制

替代方法2 將脫蠟及水合好的切片浸入胃蛋白酶或胰蛋白酶中8-10 min(胃蛋白酶:0.25%-0.5%溶于HCl PH2,胰蛋白酶0.25%-0.5%溶于0.01N HCl )

替代方法3: 將脫蠟及水合好的切片浸入含200ml 0.1M的檸檬酸緩沖液PH 6 的塑料盒中,置于微波爐中350W(低檔)處理5 min。

3 冰凍切片的預處理

4 其它難于處理的組織切片的預處理

5 陽性對照及陰性對照的準備

TUNEL檢測同時需要設陽性和陰性對照,以顯示試驗的客觀性及性。因此需要按下述方法準備兩個樣本來制備陽性及陰性片,其后續步聚與待測樣本同樣進行。

A:陽性對照樣本的準備

組織樣本在蛋白酶K處理、PBS浸洗后,細胞樣本在Triton X-100通透液處理、PBS浸洗后,再加入100μL DNase I反應液(10U-3000U DNase I,40mM Tris-HCl PH 7.9,10 mM NaCl, 6mM MgCl2, 10mM CaCl2)(用戶自備)室溫—37℃處理10 —30 min,其余步驟均相同。如有問題詳見Page 9.

B:陰性對照樣本的準備

在Page 8標記反應制備TdT酶反應液時,不添加TdT酶,其余步驟均相同。

五 標記和顯色反應:

操作注意事項:

1. 進行PBS清洗時,以5分鐘清洗3次為標準。

2. PBS清洗后,為了各種反應的進行,請盡量除去PBS溶液后再進行下一步反應

3. 在載玻片上的樣本上加上實驗用反應液后,請蓋上蓋玻片或保鮮膜,或在濕盒中進行,這樣可以使反應液均勻分布于樣本整體,又可以防止反應液干燥造成實驗失敗。

4. TdT酶反應液即用即配,短暫于冰上保存。不宜保存,保存會導酶活性的失活。

5. 如果20×DAB溶液顏色變深成為紫色,則不可使用,需重新配制。

6. 用甲基綠(Methyl Green)染液(3-5%甲基綠溶于0.1M醋酸巴比妥 PH4.0)染色后,請用滅菌蒸餾水清洗多余的甲基綠。然后進行洗凈(100%乙醇)、脫水(二甲苯)透明、封片后通過光學顯微鏡觀察操作。如果此時使用80~90%的乙醇洗凈時,甲基綠比較容易脫色,注意快速進行脫水操作。

六 常見問題的原因及推薦解決方案.

 

現象

可能原因

建議

非特異性染色(例如:非凋亡細胞的強染色)

Biotin-dUTP的非特異性結合

勿使細胞干涸

在TdT酶反應之后,再用含0.1% Triton X-100和1 mg/ml BSA 的PBS洗三次。

TdT酶的濃度過高

用TdT dilution buffer* 作1:2——1:10稀釋,

內源過氧化物酶未被封閉

封閉液室溫(15-25℃)封閉10min(封閉液: 3%H2O2溶于甲醇)

光照紫外線導致包埋試劑的聚合(如:甲基丙烯酸會導致樣本DNA的斷裂)

嘗試改用其它包埋材料或其它聚合試劑

在固定組織時樣本DNA已斷裂(內源核酸酶的作用)

確保樣品取樣后立即固定或通過肝靜脈灌注固定

固定后某些核酸酶活性依然較高導致DNA斷裂

用含有dUTP和 dAPT的溶液封閉

染色背景較高

福爾馬林固定導致某些含黑色素前體的細胞染成黃色

嘗試以甲醇固定,但可能會降低檢測的敏感性。

內源過氧化物酶未被封閉

封閉液室溫(15-25℃)封閉10min(封閉液: 3%H2O2溶于甲醇)

Biotin-dUTP的非特異性結合

在TdT酶反應之后,再用含0.1% Triton X-100和1 mg/ml BSA 的PBS洗三次。

樣本被支原體污染

使用支原體檢測試劑盒檢測,如陽性則制備未被污染的新樣本

標記反應試劑(TdT酶及dUTP)的濃度過高

稀釋50%,以降胝的標記反應的濃度

細胞處于高度增殖期

在非高增殖期取樣檢測

DAB孵育時間過長

減少DAB染色時間

標記率低、染色淡至無

如果以乙醇或甲醇固定的樣本則標記效率較低(因為在固定時染色質未能與蛋白質交聯,而在操作中丟失)

用溶于PBS PH7.4中的4%多聚甲醛固定

或福爾馬林或戊二醛固定。

過度的固定導致與蛋白過度交聯

縮短固定時間,或用溶于PBS PH7.4的2%多聚甲醛固定

促滲條件不佳,以致于試劑不能到達靶分子或濃度過低

l 增加通透劑促滲時間

l 增加通透劑的作用溫度(15-25℃)

l 優化蛋白酶K的作用濃度和作用時間(如:以400ug/ml作用5min)

l 0.1M的檸檬酸鈉70℃作用30min。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

復染信號較弱

選擇的染料不合適

用溶于0.1M醋酸巴比妥的r3-5%甲基綠PH4.0,或蘇木素復染

陽性對照沒有信號

 

 

l 冷凍切片使用3U/mlR的DNase I

l 石蠟切片使用 1500U/ml的DNase I

l 一般樣本使用10U/ml DNase I/

l 反應緩沖液:10mM Tris-HCl PH 7.9 10 mM NaCl, 5mM MnCl2, 10mM CaCl2 25mM KCl2 37℃ 反應30 min,PBS洗去。

組織樣本從載玻片脫落

組織樣本被酶從玻片消化下來

降低蛋白酶K的處理時間

 

氯霉素檢測試劑盒elisa試劑盒供應

氯霉素檢測試劑盒elisa試劑盒供應說明書,請仔細閱讀說明書并按說明使用或在我司業務員指導下購買和使用

產品性狀:液體產品用途:科研實驗專用產品規格:96T/48T96T指可以做84個標本,12個標準曲線48T指可以做42個標本,6個標準曲線

主要銷售進口elisa試劑盒、人elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒等科研試劑盒,產品優質耐用,性價比好,值得信賴。

氯霉素檢測試劑盒elisa試劑盒供應特點:

① 準確度高,靈敏度高,特異性強;② 檢測時間短;③ 操作簡便;④ 安全可靠,歡迎咨詢。

氯霉素檢測試劑盒elisa試劑盒供應標本的采集及保存:

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000xg離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-81000xg離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000xg離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

4. 樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍。

注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

氯霉素檢測試劑盒elisa試劑盒供應實驗原理:

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗C3抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD),計算樣品濃度。

該公司產品分類: 配件及耗材 其他生化試劑 緩沖劑類 表面活性劑 實驗室常規設備 分析儀器 冷凍干燥機 鋁液測氫儀 分離材料及耗材 維生素類 氬氣凈化器 平移振蕩消解器 色素類 碳水化合物類 石墨消解器 微波類儀器 植物激素及核酸類 抗生素類 微波消解儀 制冷水循環器

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